Buenos días, me llamo Rocío García-Huede.
Voy a presentar el tema de mi tesis doctoral,
que trata de la función programadora de los andrógenos
en el metabolismo energético y la conducta de la ingesta,
dirigida por Paloma Collado-Girau y Beatriz Carillo Urbano.
Forma parte del programa de doctorado en psicología y, en concreto, estos
estudios se están realizando en el Departamento de Psicobiología de la UNED.
En primer lugar, voy a introducir
brevemente el porqué de este tema de tesis.
Se sabe que la aparición de los astronos alimenticios está
relacionada con la programación de los circuitos cerebrales
que controlan la conducta de la ingesta localizados en el hipotálamo.
Y se sabe también que esta estructura presenta una
ventana crítica de maduración después del nacimiento
y que péptidos como la leptina y la
grelina, así como los esteroides gonadales,
estarían influyendo en dicha maduración en distintos
momentos de esta ventana crítica del desarrollo.
En concreto, se ha visto que la ventana crítica para que
ejerzan su acción sobre el desarrollo del hipotálamo,
en el caso de la leptina y la grelina, sería a día
posnatal 12, 12 días después del nacimiento del animal,
y se ha visto que la ausencia de estos péptidos durante
el desarrollo alteraría el patrón de conectividad,
en concreto del núcleo paraventricular del hipotálamo,
y que el tratamiento con estos péptidos
recuperaría este patrón organizador normal,
lo que demuestra que efectivamente tanto la leptina como la grelina
actuarían como factores tróficos en el hipotálamo durante el desarrollo.
En el caso de este grupo de investigación nos centramos en
la función de los esteroides gonadales durante el desarrollo.
¿Y por qué los esteroides gonadales? ¿Qué nos llevó
a pensar que podían tener una función organizadora?
Distintos estudios han visto que un incremento en los
niveles de estradiol durante períodos críticos
de tiempo, durante estas ventanas sensibles,
determina el proceso de diferenciación
de algunas estructuras cerebrales,
muchas de ellas relacionadas con conducta
sexual, con el desarrollo de la pubertad, etc.
Un desceso en los niveles de estradiol, además, cursa
con un incremento en la ingesta y el peso corporal
que se revierte mediante el tratamiento con esta misma hormona,
lo que llevó a pensar que también el estradiol podía estar implicado
en la organización de circuitos relacionados con la ingesta,
no sólo con la pubertad y el desarrollo sexual.
Además, por otro lado, se ha visto que el día
del nacimiento, en este caso de las ratas,
que es nuestro sujeto de estudio, se ha dado un pico de testosterona,
que promueve la diferenciación del volumen y el número
de neuronas de diferentes estructuras cerebrales.
En esta línea de investigación, estudios
realizados por este mismo grupo,
pusieron de manifiesto la importancia del estradiol
en el desarrollo de los circuitos hipotalámicos.
En concreto, se bloqueó el sistema astrogénico en la ventana
anquídica del desarrollo, entre postnatal 6 y postnatal 13,
y se vio un efecto dimórfico, o sea, sexualmente dimórfico,
distinto para machos y para hembras, con este tratamiento.
Se vio que, en el caso de los machos, el bloqueo
del sistema astrogénico disminuía el peso corporal,
y en el caso de las hembras, el tratamiento lo
que hacía era disminuir los niveles de POMCE,
que es un péptido anorexígeno, o sea, que
inhibe la ingesta a nivel del hipotálamo.
O sea, que se demostró que el bloqueo de este sistema
astrogénico estaba afectando al desarrollo del hipotálamo.
Y en la línea de los andrógenos, Noara y sus colaboradores
vieron que la exposición temprana a testosterona
afectaba la organización del sistema de melanocortina,
el sistema que es controlado por el péptido POMCE,
que vimos anteriormente en la diapositiva previa.
Se vio que el tratamiento con testosterona en los primeros días de vida
hacía que las hembras mostrasen un patrón que estaba un poco a caballo
entre el patrón de las hembras control y de los machos control.
Se vio que disminuía los niveles de POMCE a unos
niveles similares a los que tienen los machos
y un poco más alejados de los que tienen
las hembras, como vemos en esta gráfica.
Con estos estudios en mente, el objetivo
de mi tesis consistiría en comprobar si los andrógenos, al igual que
otras hormonas, durante el desarrollo
participan en la programación del metabolismo energético
y los circuitos hipotalámicos que regulan la ingesta.
Y esto lo hicimos mediante el bloqueo del sistema androgénico,
al contrario que el estudio previo que he mostrado de Noara.
Y dentro de los objetivos específicos estaría
estudiar en concreto la población glial
del núcleo arqueado del hipotálamo a distintas edades,
a posnatal 11 cuando todavía las ratas son
crías, a posnatal 21 el día del destete,
posnatal 60 que se considera joven adulto y
posnatal 90 que ya se considera un adulto formado,
para ver cómo el bloqueo del sistema androgénico ha
afectado al desarrollo del hipotálamo a estas edades.
Para conseguir este objetivo, lo que
hicimos fue bloquear el sistema androgénico
durante los primeros días del desarrollo.
Ya he comentado que el primer día posnatal
se produce un pico de testosterona
que tiene función organizadora en el cerebro.
Entonces teníamos que bloquear este
sistema justo en los primeros días de vida.
Y lo que hicimos fue bloquear distintas vías
del sistema mediante distintos reactivos.
Tenemos por un lado la glutamida que
bloquea los receptores de testosterona.
Por otro lado tenemos el letrozol que
bloquea el Paso de testosterona a estradiol
porque muchas acciones de la testosterona se llevan
a cabo mediante su aromatización a estradiol.
Y por otro lado el finasteride que bloqueaba
el Paso de testosterona a dihidrotestosterona
que es la forma más activa de la testosterona.
Luego dejamos crecer a las crías y se fueron
extrayendo los cerebros a distintos
tiempos, como he dicho P11, P21, P60, P90,
para realizar cortes y en cada corte teñir mediante
inmunohistoquímica con distintos anticuerpos.
Por un lado teñimos con IVA1 que marca la microglía,
que son las células de defensa del cerebro.
Por otro lado GFAP que marca astrocitos,
que son las responsables de mantener
un equilibrio metabólico en el cerebro.
Por otro lado la vimentina que marca la glía radial,
responsable de organizar durante el desarrollo del cerebro.
Y Ponce que, como he dicho al principio, es un péptido anorexígeno
y que se ve muy afectado con los tratamientos hormonales.
Por el momento este es el aspecto de
las tinciones que hemos ido realizando.
Por un lado tenemos el NISL, que es la tinción genérica,
para contar el número general de células que hay en el cerebro.
Por otro lado esta es la tinción con IVA1, que marca la microglía.
Ya hemos contado el número de células gliales y de cada tipo,
porque podemos tener glía activa o glía inactiva.
Esta sería la tinción con GFAP.
Como vemos aquí no hay astrocitos porque
el cerebro todavía está demasiado inmaduro.
Esta sería la muestra de P11.
Esperamos que en la muestra de P21, que ya el cerebro está más maduro,
haya mayor presencia de astrocitos en el
arqueado y una menor presencia de vimentina.
La vimentina, como he dicho, marca glía radial,
que mediante estos procesos dirige la migración
de las neuronas a sus zonas de destino
y que cuando ya haya cumplido su misión
madurará y se convertirá en astrocitos.
Entonces en P21 esperamos ver mucha
menos vimentina y mucho más astrocito.
Este sería el tema de mi tesis.
Muchas gracias por su atención.
Espero que haya quedado claro el objetivo y la
importancia del estudio que estamos realizando.
Muchas gracias.
[Sin audio]